"Ku812:人外周血嗜堿性白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：懸浮

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CTX TNA2細胞類似產(chǎn)品：：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞

PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞類似產(chǎn)品：：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞

MC3T3-L1細胞類似產(chǎn)品：：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞

HDMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Ku812:人外周血嗜堿性白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

ME180細胞類似產(chǎn)品：：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞

HIT clone T15細胞類似產(chǎn)品：：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞

Normal Rat Kidney-49F細胞類似產(chǎn)品：：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標(biāo)記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：２傳代。３天內(nèi)可長滿

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

alpha-TC1.6細胞類似產(chǎn)品：：Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞

HO8910細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞

BHP-10細胞類似產(chǎn)品：：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞

130T細胞類似產(chǎn)品：：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞

SNU5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞

GTL-16細胞類似產(chǎn)品：：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞

NH6細胞類似產(chǎn)品：：MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞

SKM-1細胞類似產(chǎn)品：：HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞

NCI H23細胞類似產(chǎn)品：：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞

Hs-27細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞

MV3細胞類似產(chǎn)品：：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞

Y 1細胞類似產(chǎn)品：：MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞

WM 2664細胞類似產(chǎn)品：：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞

HS-729細胞類似產(chǎn)品：：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞

NCIH2342細胞類似產(chǎn)品：：RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞

L1210細胞類似產(chǎn)品：：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞

L1210細胞類似產(chǎn)品：：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞

HUASMC細胞類似產(chǎn)品：：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞

SKNBE(2)細胞類似產(chǎn)品：：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞

CCRF細胞類似產(chǎn)品：：EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞

NCI-H2052細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞

Y3.AG.1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞

SK BR 03細胞類似產(chǎn)品：：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞

alpha TC1.6細胞類似產(chǎn)品：：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞

Ku812:人外周血嗜堿性白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HMVEC細胞類似產(chǎn)品：：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞

MLE12細胞類似產(chǎn)品：：KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞

P3J HR-1細胞類似產(chǎn)品：：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞

293A細胞類似產(chǎn)品：：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞

Hs 766.T細胞類似產(chǎn)品：：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞

H-676B細胞類似產(chǎn)品：：MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞

H146細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞

Mel-624細胞類似產(chǎn)品：：CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞

PATU-S細胞類似產(chǎn)品：：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞

REC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞

MOLM-16細胞類似產(chǎn)品：：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞

NCI-H87細胞類似產(chǎn)品：：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞

Y1細胞類似產(chǎn)品：：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞

H460細胞類似產(chǎn)品：：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞

Panc813細胞類似產(chǎn)品：：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞

HTR8/SVneo細胞類似產(chǎn)品：：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞

RPMI-8402細胞類似產(chǎn)品：：SuperTube細胞、ABE-8.1/2細胞、HDMEC細胞

HOC-1細胞類似產(chǎn)品：：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞

OV 2008細胞類似產(chǎn)品：：FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞

CD18細胞類似產(chǎn)品：：LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞

SLK細胞類似產(chǎn)品：：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞

CEK細胞類似產(chǎn)品：：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞

BC-027細胞類似產(chǎn)品：：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞

MDA MB 175 VII細胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞

SNG-M細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞

RL-952細胞類似產(chǎn)品：：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞

Lewis-Lung細胞類似產(chǎn)品：：NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞

SVHUC細胞類似產(chǎn)品：：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞

SKMEL3細胞類似產(chǎn)品：：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞

MDA157細胞類似產(chǎn)品：：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞

MOLP-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞

NCI-H526細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞

C-28I2細胞類似產(chǎn)品：：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞

BJ [Human fibroblast]細胞類似產(chǎn)品：：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞

Human Liver-7702細胞類似產(chǎn)品：：JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞

NCIH244細胞類似產(chǎn)品：：LIPF155C細胞、WM35細胞、UMRC-2細胞

293FT細胞類似產(chǎn)品：：Panc327細胞、Adeno 293細胞、LS 123細胞

BHP-10細胞類似產(chǎn)品：：SK-Mel 2細胞、CATHa細胞、BJA-B1細胞

EA hy 926細胞類似產(chǎn)品：：GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞

NCI-SNU-1040細胞類似產(chǎn)品：：DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞

TE-6細胞類似產(chǎn)品：：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞

H-2081細胞類似產(chǎn)品：：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞類似產(chǎn)品：：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞

OACP4C細胞類似產(chǎn)品：：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞

Ca9-22細胞類似產(chǎn)品：：C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞

NCI-H1437細胞類似產(chǎn)品：：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞

HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞

BCaP 37細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞

MDAMB435細胞類似產(chǎn)品：：NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞

NOMO1細胞類似產(chǎn)品：：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞

SUDHL8細胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞

HEK-293A細胞類似產(chǎn)品：：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞

NB-9細胞類似產(chǎn)品：：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞

HS-766T細胞類似產(chǎn)品：：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞

EJ細胞類似產(chǎn)品：：Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞

MonoMac 6細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞

C38細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞

NCI-H1437細胞類似產(chǎn)品：：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞

Ramos 1細胞類似產(chǎn)品：：HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞

NCI-H2135細胞類似產(chǎn)品：：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞

Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞類似產(chǎn)品：：U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞

NS1/1-Ag4.1細胞類似產(chǎn)品：：JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞

Hs688(A)T細胞類似產(chǎn)品：：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞

N1E115細胞類似產(chǎn)品：：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞

SCL2細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞

CEM C7細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞

Hs-281-T細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞

HPAEpiC細胞類似產(chǎn)品：：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞

OV1-P細胞類似產(chǎn)品：：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞

HLEC-B3細胞類似產(chǎn)品：：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞

RD細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞

UMUC-14細胞類似產(chǎn)品：：HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞

Medical University of Graz-Chordoma 1細胞類似產(chǎn)品：：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞

NCIH524細胞類似產(chǎn)品：：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞

AG06814-J細胞類似產(chǎn)品：：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞

L- cell細胞類似產(chǎn)品：：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞

CBRH-7919細胞類似產(chǎn)品：：MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞類似產(chǎn)品：：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞

118MG細胞類似產(chǎn)品：：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞

SuDHL 8細胞類似產(chǎn)品：：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞

H1734細胞類似產(chǎn)品：：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞

FRO細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞

Ku812:人外周血嗜堿性白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCI-H596細胞類似產(chǎn)品：：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞

TF-1a細胞類似產(chǎn)品：：Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞

JM-1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞

CAOV3細胞類似產(chǎn)品：：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞

Hs 729細胞類似產(chǎn)品：：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞

T84細胞類似產(chǎn)品：：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞

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