"SK-MEL-3 Cell|人惡性黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個(gè)相對穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細(xì)胞生長：貼壁

NCTC 929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞

HCC1954 BL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、CHOS細(xì)胞

NCI-H1836細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GRSL細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞

C1498細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 EBNA細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、GM17346細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SK-MEL-3 Cell|人惡性黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

COLO-320-HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞

RPMI 1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞

LICR-LON-HN6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞

MB157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：３-１：５傳代，２-３天換液１次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

COLO-320-HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞

RPMI 1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞

LICR-LON-HN6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞

MB157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

293H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞

X63Ag8-653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞

B16F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞

U118細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞

NCIH660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞

GM04680細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞

Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞

3T6-Swiss albino細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-9/S1細(xì)胞、STC-1細(xì)胞、G361細(xì)胞

aNK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA8細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞

EJ 138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞

SK-MEL-3 Cell|人惡性黑色素瘤細(xì)胞

SW1990細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞

IMR-32細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BpRcl細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞

KU 19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞

MV4II細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞

526 mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞

HCAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞

HCAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞

H-1573細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞

JCA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞

RAG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞

P815細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞

Leukemia 1210細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞

QGY7701細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞

RGB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞

HEL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC 4細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞、H2052細(xì)胞

U-138 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞

HT 1080細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KG1A細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞

MDA-MB-435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞

NOMO1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞

TE3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞

KE-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞

95D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞

ZR-75-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞

Hs 832(C).T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞

ECC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞

H-716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞

Swiss/3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞

Ramos(RA1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞

SuDHL 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞

SK-MEL-3 Cell|人惡性黑色素瘤細(xì)胞

MLM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞

Walker-256-TC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR22R細(xì)胞、EFM192細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞

NCI-SNU-668細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞

CHAGOK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞

KYSE 520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞

SRS-82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BIC-1細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞

HO1-N-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞

HCCC9810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞

Soleus clone 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞

FHL-124細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL3細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞

Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞

MOLP-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞

LM TK negative細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞

AMC-HN-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞

SW 1088細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞

3T3-Swiss albino細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞

Lewis-Lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞

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