"KP-N-NS Cell|人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
細(xì)胞背景資料:源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】1)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握HAO消化濃度,當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
HB 611細(xì)胞類似產(chǎn)品::RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞
MB39細(xì)胞類似產(chǎn)品::Mc Ardle 7777細(xì)胞、3AA細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞
SHG44細(xì)胞類似產(chǎn)品::HEK293S細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞類似產(chǎn)品::SCL-2細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞
H719細(xì)胞類似產(chǎn)品::SUDHL2細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
KP-N-NS Cell|人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻,通常操作步驟:做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開一點(diǎn)孔底即可,不要離底太GAO)直接接入,移液器不需完全打到Zui大,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不HAO),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基,晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤(rùn)孔底,其它孔依此類推,這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的,細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板HAO掌握,效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后),先順時(shí)針搖晃3次,馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
KPL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞
NCI747細(xì)胞類似產(chǎn)品::N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
SK-N-SH細(xì)胞類似產(chǎn)品::Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞類似產(chǎn)品::SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)
KPL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞
NCI747細(xì)胞類似產(chǎn)品::N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分
細(xì)胞系(cell line)指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。(由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系(FiniteCellLine)、無(wú)限細(xì)胞系(InfiniteCellLine)),因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞(定環(huán)境下口語(yǔ)和書面語(yǔ)都使用),廣義是指可傳代的細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成,多呈類上皮型細(xì)胞,常已傳幾十代或百代以上,并具有不死性和異體接種致瘤性,喪失接觸抑制能力。國(guó)際上美、英和日本等國(guó)已建有細(xì)胞庫(kù);美國(guó)已有美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫(kù)或細(xì)胞銀行(ATCC)和人遺傳突變細(xì)胞庫(kù)(HGMR)、細(xì)胞衰老細(xì)胞庫(kù)(CAR)等,其中ATCC不僅是美國(guó)也世界大的細(xì)胞庫(kù)。細(xì)胞系建立要求:什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞,視具體情況而定,無(wú)統(tǒng)一規(guī)定。對(duì)于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一,取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可,如用做長(zhǎng)期培養(yǎng),別是反復(fù)傳代的細(xì)胞,常需做如下說(shuō)明:組織來(lái)源:細(xì)胞供體所屬物種,來(lái)自人體或者動(dòng)物;個(gè)體性別、年齡;取材的器官或組織。如系腫瘤組織,應(yīng)說(shuō)明臨床和病理診斷,以及病歷號(hào)等。細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè):了解細(xì)胞一般和殊的生物學(xué)性狀,如細(xì)胞一般形態(tài),異結(jié)構(gòu),細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和分裂指數(shù),倍增時(shí)間,接種率等。如為腫瘤細(xì)胞,為說(shuō)明來(lái)源于原腫瘤組織并保持惡性,須做軟瓊脂培養(yǎng),異體接種致瘤和對(duì)正常組織侵潤(rùn)力等實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)條件和方法;應(yīng)說(shuō)明細(xì)胞系(或株)適應(yīng)的生存環(huán)境,即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。
293T/17細(xì)胞類似產(chǎn)品::SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞
A10細(xì)胞類似產(chǎn)品::SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞
H-929細(xì)胞類似產(chǎn)品::C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
SU-DHL-16細(xì)胞類似產(chǎn)品::RH8994細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞、H184A1細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞類似產(chǎn)品::Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
SF 295細(xì)胞類似產(chǎn)品::MDA-MB 453細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞
WM 2664細(xì)胞類似產(chǎn)品::TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞
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H295R-S1細(xì)胞類似產(chǎn)品::AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
DSL-6A/C1細(xì)胞類似產(chǎn)品::OVCAR-420細(xì)胞、MDA175細(xì)胞、A427細(xì)胞
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Ramos (RA 1)細(xì)胞類似產(chǎn)品::hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞類似產(chǎn)品::Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
THP1細(xì)胞類似產(chǎn)品::HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
HCT_116細(xì)胞類似產(chǎn)品::RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞類似產(chǎn)品::HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
OEC19細(xì)胞類似產(chǎn)品::TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
C32 [Human melanoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品::T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
253J-Bladder-V細(xì)胞類似產(chǎn)品::LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞
GM15452細(xì)胞類似產(chǎn)品::Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
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NCI-H460細(xì)胞類似產(chǎn)品::SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
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C17.2細(xì)胞類似產(chǎn)品::U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞類似產(chǎn)品::CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
NCI-SNU-387細(xì)胞類似產(chǎn)品::Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞
MIA PaCa-2細(xì)胞類似產(chǎn)品::NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
T. T細(xì)胞類似產(chǎn)品::Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞
RS4:11細(xì)胞類似產(chǎn)品::PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞類似產(chǎn)品::L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
H-2444細(xì)胞類似產(chǎn)品::CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞
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SU-DHL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
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關(guān)鍵字: KP-N-NS Cell|人腎上腺神經(jīng)母;
上海冠導(dǎo)生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國(guó)內(nèi)外細(xì)胞庫(kù)引進(jìn)細(xì)胞2000余株。以此為契機(jī),公司組建了冠導(dǎo)細(xì)胞庫(kù),我司細(xì)胞均由資深細(xì)胞培養(yǎng)工程師進(jìn)行培養(yǎng)。我司可以提供的細(xì)胞有:①細(xì)胞系②原代細(xì)胞③穩(wěn)轉(zhuǎn)株④耐藥株⑤標(biāo)記細(xì)胞⑥細(xì)胞配套試劑等。