"NCI-H460 Cell|人大細胞肺癌細胞

細胞背景資料：該細胞１９８２年由A.F.Gazdar建系，源自一位患有大細胞肺癌的男性的胸腔積液。該細胞角蛋白、波形蛋白陽性。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數板計數后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

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HEK293-A細胞類似產品：：293F細胞、Jiyoye細胞、HIBEpiC細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H460 Cell|人大細胞肺癌細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

H-1694細胞類似產品：：HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞

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NCI-H1954細胞類似產品：：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

液氮罐使用注意事項：初次使用前檢查容器內膽是否清潔干燥，外部有無凹陷及嚴重碰傷，如有輕微凹陷及碰傷，經試驗其蒸發(fā)性能不變，仍可繼續(xù)使用，如性能下降，應停止使用，避免經濟損失。液氮容器應放在陰涼干燥處，應有良HAO的通風，不應放置在靠近熱源，陽光直照，以及風口處，嚴禁放置液氮容器的房間緊閉門窗，以免室內因液氮蒸發(fā)使氧氣含量下降，造成呼吸困難。只能用于充裝液氮，凍存細胞和病毒用，嚴禁充裝液氧等易燃易爆及腐蝕性液體，以免產生猛烈燃燒、爆炸或對容器產生腐蝕。液氮是超低溫液體（-196℃），在充裝時，要穿長袖工作服、帶皮手套，以避免液氮飛濺造成凍傷。貯存容器不得作貯運容器使用。若運輸液氮。必須使用B型貯運容器。因此類容器有殊支撐結構,堅固可靠不易損壞。液氮容器在使用過程中，每天都應隨時檢查容器的使用情況，如發(fā)現(xiàn)容器瓶蓋上和上部有水珠或結霜情況，說明容器質量出現(xiàn)問題，應立即停止使用。存入取出樣品要標記，拿取東西要輕拿輕放。

MV 3細胞類似產品：：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞

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BMSCs（mBMSCs）細胞類似產品：：U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞

SNU-739細胞類似產品：：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞

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NCI-H460 Cell|人大細胞肺癌細胞

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UMRC2細胞類似產品：：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞

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H-64細胞類似產品：：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞

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