細(xì)胞增殖檢測試劑盒（MTS）

產(chǎn)品簡介：

     MTS是一個(gè)基于光吸收檢測的均相非標(biāo)記細(xì)胞活力測定試劑。一步操作，可用于細(xì)胞增殖和毒性分析，方法簡便而準(zhǔn)確。該試劑可被活細(xì)胞還原為具有高度水溶性的，可在490nm處檢測的甲臜染料，甲臜的生成量與活細(xì)胞的數(shù)量和活力成正比。

試劑的優(yōu)點(diǎn)

1. 結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好：試劑不影響細(xì)胞活力，顯色產(chǎn)物直接溶解于培養(yǎng)液，直接測定OD值即可準(zhǔn)確反應(yīng)細(xì)胞活力。

2. 操作省時(shí)簡單：試劑即開即用，只需一步操作，即可檢測。無需額外清洗，加DMSO等步驟，重現(xiàn)性好。

3. 安全性好：不含放射性同位素和有機(jī)溶劑，使用安全。

4. 靈敏度高：靈敏度高于MTT、XTT、CCK-8等方法。

使用方法:

*以下操作步驟針對96孔培養(yǎng)板培養(yǎng)每孔100μl細(xì)胞，若使用96孔外的培養(yǎng)板，試劑用量等比例增減。

1. 取出MTS試劑于室溫或37℃溶解。

2. 于培養(yǎng)有100μl細(xì)胞/孔的96孔培養(yǎng)板中加入10μl MTS試劑。

3. 將96孔培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，37℃孵育1～4小時(shí)。

*如孵育后需立即檢測，請?zhí)敛襟E4；如稍后檢測，每孔加入25μl的20% SDS溶液，避光保存，18小時(shí)內(nèi)檢測。

4. 用酶標(biāo)儀于490nm處測定OD值。

結(jié)果分析  將各測試孔的OD值減去對照孔或調(diào)零孔OD值。各平行孔的OD值取平均數(shù)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑加入后輕輕振搖培養(yǎng)板，使MTS試劑與培養(yǎng)基充分混勻。

2. 試劑加入后培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔細(xì)胞數(shù)量的多少而異。對于貼壁細(xì)胞，加入MTS的培養(yǎng)時(shí)間一般為1～4小時(shí)，但在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據(jù)細(xì)胞種類而定）。與貼壁細(xì)胞相比，懸浮細(xì)胞較難顯色。對于懸浮細(xì)胞，在加入MTS培養(yǎng)1～4小時(shí)后，可先從培養(yǎng)箱中取出，目測染色程度或用酶標(biāo)儀測定決定。白細(xì)胞較難顯色，因此需要較長的MTS反應(yīng)時(shí)間或增加細(xì)胞數(shù)量（10⁵個(gè)細(xì)胞/孔）。若顯色困難，可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時(shí)后再確定。注意：MTS的反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的時(shí)間為準(zhǔn)。

3. MTS試劑中的試劑會與還原劑反應(yīng)生成甲臜，如果實(shí)驗(yàn)中有還原劑，需要檢查背景的OD值，即在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物，然后加入MTS試劑在一定時(shí)間內(nèi)檢測，和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較（只加MTS試劑），如果OD值明顯偏高，則說明有反應(yīng)。

4. 如果樣品為高渾濁度的細(xì)胞懸液，建議設(shè)定630nm～700nm作為參比波長，扣除參比波長的OD值即可。

5. 如果要測定細(xì)胞的具體數(shù)量，需要先做一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。

6. 若測得OD值過高，可酌減鋪板細(xì)胞數(shù)或MTS試劑用量。

試劑包裝:

100次：1ml×1瓶；500次：5ml×l瓶；3,000次：5ml×6瓶；5,000次：5ml×10瓶；10,000次：100ml×l瓶。

貯藏條件:

MTS在避光0～5℃的條件下存放一年，測定效果完全不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。反復(fù)凍融會增加背景值，經(jīng)常使用時(shí)請于0～5℃條件下保存。

本試劑僅供科研使用。