PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱:禽腦脊髓炎病毒(AEV)核酸
英文名稱:詳見說明書
編號: FSP2851
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Human POTE-E(POTE-E(POTE Ankyrin Domain Family Member E)) ELISA KitHuman αHSP(Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit4-碘-1-甲基-1H-吡唑 細胞RyR受體蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
Human FDP(Fibrinogen Degradation Product) ELISA KitHuman β2-GP1 Ab IgA(β2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit異丙基氯化鎂載玻片細胞RyR受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human POTEG(POTE Ankyrin Domain Family Member G) ELISA KitHuman β2-GP1 Ab IgG(β2-Glycoprotein 1 Antibody IgG) ELISA Kit異丙基氯化鎂冰凍切片組織RyR受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human POTE-D(POTE-D(POTE Ankyrin Domain Family Member D)) ELISA KitHuman β2-GP1 Ab IgM(β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit異丙基氯化鎂石蠟切片組織RyR受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human FETUB(Fetuin B) ELISA KitHuman β-CTx(Beta Crosslaps) ELISA Kit異丙基氯化鎂 載玻片細胞RyR受體蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human FG(Fibrinogen) ELISA KitHuman Beta-MSH(beta-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit異丙基氯化鎂 冰凍切片組織RyR受體蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human FcγR3B(Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA KitHuman γMSH(gama-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit異丙基氯化鎂 石蠟切片組織RyR受體蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human fFDFT1(Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA KitHuman TPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit異丙基氯化鎂 細胞RyR受體蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
禽腦脊髓炎病毒(AEV)核酸0.025M化鈣<Cacl2>5mg91079-40-2Rat Collagenase I Elisa KitHPLC98%0.025M化鈣<Cacl2>5mgDNMT3B進口、國產(chǎn)250細胞培養(yǎng)瓶,75cm²,TC處理,紅色標準蓋,滅菌81029-05-213850-16-396T角蛋白17(KRT17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%0.025M化鈣<Cacl2>5mgDNMT3B2068-80-6高端化學(xué)試劑Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit進口、國產(chǎn)1.5mg/支*5英文名稱:20mg重組人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白 (His 標簽)120462-42-296T核因子κB(NFκB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.35mgTIMP-42068-80-6高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
原巴西蘇木素凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.35mg93-35-6Rat Collagenase I Elisa KitHPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.35mgTIMP-4進口、國產(chǎn)1.5mg/支*5英文名稱:20mg重組人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白 (His 標簽)120462-42-296T核因子κB(NFκB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.35mgTIMP-42068-80-6高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:25mg重組人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)120462-45-596T核因子κB2(NFκB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgERN11783-96-6高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mg93-35-6Rat phospho Protein Kinase C, P-PKC Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgERN1進口、國產(chǎn)250英文名稱:25mg重組人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)120462-45-596T核因子κB2(NFκB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgERN11783-96-6高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:25mg重組人 ITIH3 蛋白 (Fc 標簽)現(xiàn)貨促銷120462-46-696TV-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌基因同源物B(RELB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgSt-Ag1783-96-6高端化學(xué)試劑Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mg93-35-6Rat phospho Protein Kinase C, P-PKC Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgSt-Ag進口、國產(chǎn)250英文名稱:25mg重組人 ITIH3 蛋白 (Fc 標簽)現(xiàn)貨促銷120462-46-696TV-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌基因同源物B(RELB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgSt-Ag1783-96-6高端化學(xué)試劑Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:10mg重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白特價促銷545-46-096T軸突生長誘向因子1(Ntn1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgAAP5b1783-96-6高端化學(xué)試劑Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
非瑟酮;紫鉚素;非瑟素凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mg62499-27-8Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase, pERK Elisa KitHPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgAAP5b進口、國產(chǎn)250英文名稱:10mg重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白特價促銷545-46-096T軸突生長誘向因子1(Ntn1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgAAP5b1783-96-6高端化學(xué)試劑Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:ea重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 標簽)466-09-196T軸突生長誘向因子4(Ntn4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS、定標血漿>5mgPTH1341783-96-6高端化學(xué)試劑Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit
纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS、定標血漿>5mg62499-27-8Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase, pERK Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS、定標血漿>5mgPTH134進口、國產(chǎn)250英文名稱:ea重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 標簽)466-09-196T軸突生長誘向因子4(Ntn4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS、定標血漿>5mgPTH1341783-96-6高端化學(xué)試劑Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:20mg重組人 GLT8D2 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)82425-45-496T載脂蛋白A4(APOA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS>5mgNT-ProANP617-45-8高端化學(xué)試劑Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit
纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS>5mg62499-27-8Rat Cathepsin K, cath-K Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS>5mgNT-ProANP進口、國產(chǎn)250英文名稱:20mg重組人 GLT8D2 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)82425-45-496T載脂蛋白A4(APOA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含IBS>5mgNT-ProANP617-45-8高端化學(xué)試劑Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:30mg重組人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 標簽)現(xiàn)貨促銷16198-01-996TE選擇素(SELE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgCCDC49617-45-8高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
蘆薈甙;蘆薈大黃素甙凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mg68797-35-3Rat Cathepsin K, cath-K Elisa KitHPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgCCDC49進口、國產(chǎn)250英文名稱:30mg重組人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 標簽)現(xiàn)貨促銷16198-01-996TE選擇素(SELE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgCCDC49617-45-8高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:1ml重組人 ANTXR2 / CMG2 蛋白 (Fc 標簽)特價促銷92233-55-196T解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgPDH617-45-8高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅰ凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mg68797-35-3Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1, AMAC-1 Elisa KitHPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgPDH進口、國產(chǎn)250英文名稱:1ml重組人 ANTXR2 / CMG2 蛋白 (Fc 標簽)特價促銷92233-55-196T解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶原時間(PT)測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgPDH617-45-8高端化學(xué)試劑Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit進口、國產(chǎn)英文名稱:Amiodarone Related Compound E25mg重組人 NLGN4X 蛋白 (His 標簽)1615-94-796T解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgIS617-45-8高端化學(xué)試劑Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅱ部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mg68797-35-3Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1, AMAC-1 Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgIS進口、國產(chǎn)英文名稱:Amiodarone Related Compound E25mg重組人 NLGN4X 蛋白 (His 標簽)1615-94-796T解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<白陶土含Cacl2>5mgIS617-45-8高端化學(xué)試劑Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit進口、國產(chǎn)250英文名稱:Methylparaben 125mg重組人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白 (His 標簽)特價供應(yīng)2318-78-796T解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgSTOC70-47-3高端化學(xué)試劑Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字: 禽腦脊髓炎病毒(AEV);核酸;48T;FSP2851;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。