PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：豬流行性腹瀉病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號(hào)： FSP2810
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human SELL(L-Selectin) ELISA KitHuman IFN-α(Interferon Alpha) ELISA Kit4-羥基苯乙酸 細(xì)胞TRAIL 蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
Human SM/SPH(Sphingomyelin) ELISA KitHuman IgA1(Immunoglobulin A1) ELISA Kit氯甲酸正己酯 TRAIL 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
Human Smad4/MADH4(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4) ELISA KitHuman IgA2(Immumoglobulin A2) ELISA Kit氯甲酸正己酯TRAIL 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
Human SEMA7A(Semaphorin 7A) ELISA KitHuman IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit二丙烯酸1,6-己二醇酯TRAIL 蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
Human SEPCR/PROCR(Soluble Endothelial Protein C Receptor) ELISA KitHuman IGF2R(Insulin Like Growth Factor 2 Receptor) ELISA Kit二丙烯酸1,6-己二醇酯 細(xì)胞EGFR 蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒
Human sFMC(Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA KitHuman IGFALS(Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit) ELISA Kit2-肼吡啶載玻片細(xì)胞EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human SERT(Serotonin Transporter) ELISA KitHuman IgG1(Immunoglobulin G1) ELISA Kit2-肼吡啶冰凍切片組織EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human SIAE(Sialic Acid Acetylesterase) ELISA KitHuman IgG2(Immunoglobulin G2) ELISA Kit7-羥基香豆素石蠟切片組織EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
豬流行性腹瀉病毒PCR檢測(cè)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品FAM172A蛋白檢測(cè)試劑盒20mg4463-44-9Mouse Aquaporin 0, AQP-0 Elisa KitHPLC98%FAM172A蛋白檢測(cè)試劑盒20mgGLDC300mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH7.01）653-63-463238-66-496T蛋白Z(PROZ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%FAM172A蛋白檢測(cè)試劑盒20mgGLDC1324-80-7高端化學(xué)試劑利鈉肽受體3(NPR3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)eaCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH7.01）151151-31-496T甘丙肽(GAL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)TLC95%E選擇素檢測(cè)試劑盒20mgNT85561-96-2高端化學(xué)試劑葉酸受體1(FOLR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
標(biāo)準(zhǔn)品E選擇素檢測(cè)試劑盒20mg4463-44-9Mouse Aquaporin 0, AQP-0 Elisa KitTLC95%E選擇素檢測(cè)試劑盒20mgNTeaCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH7.01）151151-31-496T甘丙肽(GAL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)TLC95%E選擇素檢測(cè)試劑盒20mgNT85561-96-2高端化學(xué)試劑葉酸受體1(FOLR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH9.18）72003-83-996T激活蛋白C(APC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白檢測(cè)試劑盒20mgMOG-Ab1914-99-4高端化學(xué)試劑跨膜絲氨酸蛋白酶6(TMPRSS6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
標(biāo)準(zhǔn)品E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白檢測(cè)試劑盒20mg20666-12-0Mouse Aquaporin 2, AQP-2 Elisa KitHPLC95%E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白檢測(cè)試劑盒20mgMOG-Ab50mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH9.18）72003-83-996T激活蛋白C(APC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白檢測(cè)試劑盒20mgMOG-Ab1914-99-4高端化學(xué)試劑跨膜絲氨酸蛋白酶6(TMPRSS6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH9.18）74299-50-65843-65-296T吲哚乙酸(IAA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%ES1蛋白同系物，線粒體檢測(cè)試劑盒5mgESBL86167-87-5高端化學(xué)試劑神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
標(biāo)準(zhǔn)品ES1蛋白同系物，線粒體檢測(cè)試劑盒5mg20666-12-0Mouse Aquaporin 2, AQP-2 Elisa KitHPLC98%ES1蛋白同系物，線粒體檢測(cè)試劑盒5mgESBL25mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH9.18）74299-50-65843-65-296T吲哚乙酸(IAA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%ES1蛋白同系物，線粒體檢測(cè)試劑盒5mgESBL86167-87-5高端化學(xué)試劑神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)100mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH9.18）74299-50-63175-95-996T赤霉素(GA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%Ephrin-B2檢測(cè)試劑盒5mgTFF177350-04-0高端化學(xué)試劑活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
標(biāo)準(zhǔn)品Ephrin-B2檢測(cè)試劑盒5mg20666-12-0Mouse Thyroglobulin, TG Elisa KitHPLC98%Ephrin-B2檢測(cè)試劑盒5mgTFF1100mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH9.18）74299-50-63175-95-996T赤霉素(GA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%Ephrin-B2檢測(cè)試劑盒5mgTFF177350-04-0高端化學(xué)試劑活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)15mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH10.01）77181-26-196T前列腺素I合酶(PTGIS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體檢測(cè)試劑盒100mgNeu5Gc2437-29-8高端化學(xué)試劑TERF1相互作用核因子2(TINF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
標(biāo)準(zhǔn)品EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體檢測(cè)試劑盒100mg3536-49-0Mouse Thyroglobulin, TG Elisa KitHPLC98%EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體檢測(cè)試劑盒100mgNeu5Gc15mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH10.01）77181-26-196T前列腺素I合酶(PTGIS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體檢測(cè)試劑盒100mgNeu5Gc2437-29-8高端化學(xué)試劑TERF1相互作用核因子2(TINF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH10.01）1360-76-596T蕈堿型膽堿受體M1(CHRM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%Egl九同源物1檢測(cè)試劑盒20mgBrucella2437-29-8高端化學(xué)試劑溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
標(biāo)準(zhǔn)品Egl九同源物1檢測(cè)試劑盒20mg3536-49-0Mouse Inhibin, INH-A Elisa KitHPLC98%Egl九同源物1檢測(cè)試劑盒20mgBrucella50mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH10.01）1360-76-596T蕈堿型膽堿受體M1(CHRM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%Egl九同源物1檢測(cè)試劑盒20mgBrucella2437-29-8高端化學(xué)試劑溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)10mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH10.01）951-77-9110064-71-696T煙堿型膽堿受體α1(CHRNα1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%EB病早期抗原檢測(cè)試劑盒100mgAE569-64-2高端化學(xué)試劑內(nèi)β-N-乙?；被咸烟擒彰?ENGASE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
標(biāo)準(zhǔn)品EB病早期抗原檢測(cè)試劑盒100mg165660-27-5Mouse Inhibin, INH-A Elisa KitHPLC98%EB病早期抗原檢測(cè)試劑盒100mgAE10mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH10.01）951-77-9110064-71-696T煙堿型膽堿受體α1(CHRNα1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%EB病早期抗原檢測(cè)試劑盒100mgAE569-64-2高端化學(xué)試劑內(nèi)β-N-乙?；被咸烟擒彰?ENGASE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào)：951-77-913382-86-096T10kDa熱休克蛋白1(HSP10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)UV98%EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mgPro-NT14263-94-6高端化學(xué)試劑孕酮免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
工作標(biāo)準(zhǔn)品EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mg165660-27-5Mouse Chorionic Gonadotrophin β, β-CG Elisa KitUV98%EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mgPro-NT25mgCAS號(hào)：951-77-913382-86-096T10kDa熱休克蛋白1(HSP10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)UV98%EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mgPro-NT14263-94-6高端化學(xué)試劑孕酮免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH4.01）951-77-9137234-62-996T肝膠原凝集素1(CLL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mg13(S)-HODE14263-94-6高端化學(xué)試劑乙醛氧化酶1(AOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
精品EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mg1934-20-9Mouse Chorionic Gonadotrophin β, β-CG Elisa KitHPLC98%EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mg13(S)-HODE50mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH4.01）951-77-9137234-62-996T肝膠原凝集素1(CLL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%EB病衣殼抗原檢測(cè)試劑盒20mg13(S)-HODE14263-94-6高端化學(xué)試劑乙醛氧化酶1(AOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)15mgCAS號(hào)：PH值標(biāo)準(zhǔn)液（PH4.01）3992-42-5129-73-796T肌營養(yǎng)不良蛋白(DMD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)GC98%EB病核抗原3A抗體檢測(cè)試劑盒100mgMOG14263-94-6高端化學(xué)試劑血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字： 豬流行性腹瀉病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;50T;FSP2810;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
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