PCR檢測試劑盒

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱：莫巴拉病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱：Mobala Virus(MOBV)RTPCR
編號： FSP1891
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
E.coli O139抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139）特價促銷anti- Melanophilin antibody動物細(xì)胞醛酮還原酶1D（aldo-keto reductase 1D）活性比色法定量檢測試劑盒肉桂醇； beta-苯丙烯醇

E. coli LPS大腸桿菌脂多糖抗體特價促銷anti- Melatonin antibody動物細(xì)胞醛酮還原酶1E（aldo-keto reductase 1E）活性比色法定量檢測試劑盒大車前苷

EP3前列腺素E受體3抗體特價促銷anti- MEMO1 antibody動物組織醛酮還原酶1A（aldo-keto reductase 1A）活性比色法定量檢測試劑盒木通苯乙醇苷B

Endomucin內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體特價促銷anti- MEN1 antibody動物組織醛酮還原酶1B（aldo-keto reductase 1B）活性比色法定量檢測試劑盒人參皂苷Rh3

EphA1/Ephrina1/Ephrin A1 Receptor內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A抗體（腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4）特價促銷anti- MEOX2 antibody動物組織醛酮還原酶1C（aldo-keto reductase 1C）活性比色法定量檢測試劑盒3,4-二羥基苯乙醇

EphA4酪氨酸蛋白激酶A4抗體特價促銷anti- MEP1A antibody動物組織醛酮還原酶1D（aldo-keto reductase 1D）活性比色法定量檢測試劑盒鹽酸巴馬汀

Ephrin BEphrin B抗體特價促銷anti- MEPCE antibody動物組織醛酮還原酶1E（aldo-keto reductase 1E）活性比色法定量檢測試劑盒諾米林

phospho-Ephrin B(Tyr329)磷酸化Ephrin B抗體特價促銷anti- MEPCE antibody組織脂質(zhì)過氧化物 （HYDROPEROXIDE）活性二甲酚橙（XYLENOL ORANGE）比色法定量檢測試劑盒表告依春
莫巴拉病毒PCR檢測試劑盒AURAMINE O金胺OATRIP/TREX1  系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體 2-(N-Boc-3-哌啶基)乙胺Stevenleaf 絞股藍(lán)皂苷

P-NITROPHENYL PHOSPHATE 5/175MG SUBSTRATE TABLETSPNPP片劑phospho-ATRIP (Ser68+Ser72)  系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體 3-氨基環(huán)己甲酸(順反異構(gòu)體混合物)4-(二甲氨基)苯甲醛

P-NITROPHENYL PHOSPHATE 5/175MG SUBSTRATE TABLETSPNPP片劑Phospho-ATRIP (Ser224)  系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體 3-氨基-N-甲基苯甲酰胺α-Cydodextrin α-環(huán)糊精

ABTS, DIAMMONIUM SALTABTS, 二銨鹽Phospho-CHEK1 (Ser296)  磷酸化細(xì)胞周期檢測點激酶1抗體 2-溴-3-氟苯甲醛α-Cydodextrin α-環(huán)糊精

ABTS, DIAMMONIUM SALTABTS, 二銨鹽Microcephalin 1/BRIT1  小腦癥基因1/認(rèn)知相關(guān)蛋白抗體 α,ω-二甲基丙烯酸酯基聚乙二醇(MA-PEG-MA)Tin (II) chloride dihydrate 氯化亞錫（二水合物）

4-CHLORO-1-NAPHTHOL (4-CN)4-氯-1-萘酚Phospho-JunB (Thr102/Thr104)  磷酸化活化蛋白激酶B抗體 α,ω-二甲基丙烯酸酯基聚乙二醇(MA-PEG-MA)Tin (II) chloride dihydrate 氯化亞錫（二水合物）

4-CHLORO-1-NAPHTHOL (4-CN)4-氯-1-萘酚OTUB1  泛素特異性蛋白酶OTB1抗體 α,ω-二甲基丙烯酸酯基聚乙二醇(MA-PEG-MA)L-（-）-Mannose L-甘露糖

4-CHLORO-1-NAPHTHOL (4-CN)4-氯-1-萘酚RAD50  DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體 α,ω-二甲基丙烯酸酯基聚乙二醇(MA-PEG-MA)L-（-）-Mannose L-甘露糖
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。