IMDM(含雙抗)密度超過(guò)90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代(傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定),狀態(tài)穩(wěn)定,便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。1儲(chǔ)存:液氮。(2)運(yùn)輸:干冰。(3)用途:只可用于科研。(4)第二代培養(yǎng)末期液氮凍存。(5)每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。 IMDM(含雙抗)這個(gè)不僅僅是說(shuō)培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長(zhǎng)的空間密度問(wèn)題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。IMDM(含雙抗)如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問(wèn)題。
如何選用培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng),各種目的無(wú)血清培養(yǎng)的*是AIM V培養(yǎng)基(SFM)。在開(kāi)始進(jìn)行新的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)。
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