PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)PCR試劑盒
英文名稱:Echinococcus granulosusPCR
編號(hào): FSP1576
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
GPCR TAS1R3G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R3抗體特價(jià)促銷anti- EHF antibodyIL-11(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體
BAGE2腫瘤/抗原2.2抗體特價(jià)促銷anti- EHMT2/G9a antibodyIL-12 P35(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體
BAGE3腫瘤/抗原2.3抗體特價(jià)促銷anti- EI24 antibodyIL-12 P40(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)神經(jīng)降壓素受體1抗體
BAGE4腫瘤/抗原2.4抗體特價(jià)促銷anti- EID1 antibodyIL-13(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)神經(jīng)降壓素受體2抗體
KMT1C/G9a組蛋白H3賴氨酸9甲基化1C抗體特價(jià)促銷anti- EID2B antibodyIL-14(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體
COPS8信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體特價(jià)促銷anti- EIF1 antibodyIL-15(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)NDUFA9蛋白抗體
COPS6信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體特價(jià)促銷anti- EIF1AD antibodyIL-16(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)膜磷脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體
FBXO21F-box蛋白21抗體特價(jià)促銷anti- EIF1AX antibodyIL-17(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)GSK3B相互作用蛋白抗體
細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)PCR試劑盒Human NUDT2 ELISA KitFAIM1 FAS凋亡抑制分子1抗體正辛基三乙氧基硅烷左旋肉進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)CPI17 alpha 蛋白酸激酶PKC/CPI-17抗體含量:0.98
Human NUDT2 ELISA KitDEDD1 死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷矢車菊-3-0-葡糖糖苷進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)phospho-CPI17 alpha (Thr38) 酸化蛋白酸激酶PKC/CPI-17抗體含量:HPLC≥98%
Human NUDT16 ELISA KitDEDD2 死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷矢車菊進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ADRA2 ADRA2上能受體2抗體含量:HPLC≥94%
Human NUAK2 ELISA KitDIS/CCAR1 細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體3-噻吩甲醛5-羥色酸(5-HTP)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ADRB1 上能受體β1抗體含量:HPLC≥98%
Human NUAK2 ELISA KitDPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體3-噻吩甲醛亥茅酚苷進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)APE/Girdin 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體含量:HPLC≥98%
Human NUDT19 ELISA KitDUSP22/JSP1 雙特異性磷酸酶22抗體1,2,3,4-四氫萘(THN)異鼠李-3-O-新橙皮苷進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)Drebrin 腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體含量:HPLC≥98%
Human NUB1 ELISA KitFKBP38 FK506結(jié)合蛋白38抗體?;撬嶙仙撿`; 紫堇醇靈進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)DAG1 肌相關(guān)蛋白DAG1抗體含量:HPLC≥98%
Human NUDT21 ELISA KitFOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉頭蛋白O1/O3/O4抗體?;撬岣啕惢? 馬卡因進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ADRB2 上能受體β2抗體(β2-AR )含量:HPLC≥98%
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字: 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng);PCR試劑盒;50T;FSP1576;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門(mén)針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú))的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問(wèn)題可申請(qǐng)退換,有技術(shù)疑問(wèn)可隨時(shí)給于解答,一對(duì)一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。