"HSC-4 Cells|人口腔鱗癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
KBM-7/Hap8細胞系相關產(chǎn)品:HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
NCIH1793細胞系相關產(chǎn)品:D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞
SU 86.86細胞系相關產(chǎn)品:UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
細胞生長:貼壁
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
HSC-4 Cells|人口腔鱗癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關產(chǎn)品:BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
C-127細胞系相關產(chǎn)品:McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
UMR106細胞系相關產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
細胞傳代方法:1 x 10^5 cells/10cm dish
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HSC-4 Cells|人口腔鱗癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
IHH-4細胞系相關產(chǎn)品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關產(chǎn)品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
DSL6A/C1細胞系相關產(chǎn)品:HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
Hs895.T細胞系相關產(chǎn)品:BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
MBVP細胞系相關產(chǎn)品:COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
BCP1細胞系相關產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
B16F10細胞系相關產(chǎn)品:CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
UACC812細胞系相關產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
IOSE-Van細胞系相關產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
KY70細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
NCI-H1819細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
B78細胞系相關產(chǎn)品:RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
HSC-4 Cells|人口腔鱗癌細胞系
LC-1/sq細胞系相關產(chǎn)品:Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
MV-522細胞系相關產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
RPTC細胞系相關產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
MPC-5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
3 LL細胞系相關產(chǎn)品:UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
M-1細胞系相關產(chǎn)品:HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
N-Tera-2細胞系相關產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
N-Tera-2細胞系相關產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
HCC-1438細胞系相關產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
H-209細胞系相關產(chǎn)品:253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
293 Ad5細胞系相關產(chǎn)品:MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
16HBE140細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
MKN74細胞系相關產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
SKCO 1細胞系相關產(chǎn)品:TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
SUM 159細胞系相關產(chǎn)品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
H-1915細胞系相關產(chǎn)品:S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
HANK1細胞系相關產(chǎn)品:MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
MT4細胞系相關產(chǎn)品:B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
TK-10細胞系相關產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
SU-86-86細胞系相關產(chǎn)品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
Hs 822.T細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產(chǎn)品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
BT細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
PCI-04B細胞系相關產(chǎn)品:CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
Dami細胞系相關產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
SUM 149細胞系相關產(chǎn)品:Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
TO 175.T細胞系相關產(chǎn)品:RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
3T6 Swiss Albino細胞系相關產(chǎn)品:D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞
PMVEC細胞系相關產(chǎn)品:BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
H498細胞系相關產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
RCS細胞系相關產(chǎn)品:A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品:NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
JROECL 33細胞系相關產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
SUM-149細胞系相關產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞
Hs 578Bst細胞系相關產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞
HSAS4細胞系相關產(chǎn)品:A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
MPC 11細胞系相關產(chǎn)品:KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞
EB1細胞系相關產(chǎn)品:Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞
MBdSMC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
RAW264細胞系相關產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
CAL-62細胞系相關產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
HEY A8細胞系相關產(chǎn)品:ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
HepG2細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞
alpha-TC1-6細胞系相關產(chǎn)品:SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
RCC10細胞系相關產(chǎn)品:LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
JJN3細胞系相關產(chǎn)品:DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
V 79細胞系相關產(chǎn)品:Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
HSC-4 Cells|人口腔鱗癌細胞系
SN12-PM6細胞系相關產(chǎn)品:Panc08.13細胞、FHCRC-11細胞、3D4/21細胞
HMVEC細胞系相關產(chǎn)品:NCI H226細胞、HO1-N1細胞、HTh 74細胞
B16F10細胞系相關產(chǎn)品:CFPAC細胞、207細胞、NB1RGB細胞
H1581細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、HHUA細胞、P3X63 Ag8.653細胞
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