"HCC1428 Cells|人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
SK-N-BE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
細胞生長：貼壁
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
HCC1428 Cells|人乳腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
SUP-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
C42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２-３次。
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟：１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２-５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２-３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1428 Cells|人乳腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長，偶爾上皮細胞液泡的形成
Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
SKMel-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞
BEL7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
KALS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
RKO-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
CF Pac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
HCC1428 Cells|人乳腺癌細胞系
BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
NCI-H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
P-388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
IBRS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
Hs 766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
KOPN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
MZCRC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
HNSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
KMS-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
HCC202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
SACC-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞
A-375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞
SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
KMS-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞
H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
Hs-606-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞
CWR22R-V1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
NCI-H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
HCC1428 Cells|人乳腺癌細胞系
MX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細胞、K1細胞、ACC-M細胞
H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8402細胞、TSCC1細胞、NCI-H2107細胞
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、OE21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細胞、H-526細胞、Hs 888Lu細胞
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