"L-5178-Y細胞：小鼠淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非常考究你的功夫的！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
HFSF細胞系相關產(chǎn)品：526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
RCC-JF細胞系相關產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
HL-60細胞系相關產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
SNU368細胞系相關產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
P-815細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
S.B.細胞系相關產(chǎn)品：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
SK-N-BE2細胞系相關產(chǎn)品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
PC14細胞系相關產(chǎn)品：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
SK Mel 24細胞系相關產(chǎn)品：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
RCK-8細胞系相關產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
SW1783細胞系相關產(chǎn)品：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
Chang liver細胞系相關產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
SR細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
Hs 766.T細胞系相關產(chǎn)品：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
SUM 52PE細胞系相關產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
PL5細胞系相關產(chǎn)品：PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
MDCKII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
SBC-5細胞系相關產(chǎn)品：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
OVCAR.4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
BHK-21細胞系相關產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
AX-Mel細胞系相關產(chǎn)品：TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
HLF細胞系相關產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
NCI-SNU-449細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
HCC-1395細胞系相關產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
MM.1S細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞
H-1581細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
DLD-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
ELD-1細胞系相關產(chǎn)品：SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
Huh 7.5.1細胞系相關產(chǎn)品：LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞
TKB-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
U138MG細胞系相關產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
NCI-841細胞系相關產(chǎn)品：AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
WIL2S細胞系相關產(chǎn)品：TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
HepG2-luc細胞系相關產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關產(chǎn)品：TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
OVCA433細胞系相關產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
HOS/MNNG細胞系相關產(chǎn)品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
FL-83B細胞系相關產(chǎn)品：SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
MDCK細胞系相關產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
GM-3573細胞系相關產(chǎn)品：CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞
DHL4細胞系相關產(chǎn)品：IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
H1385細胞系相關產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
SW480E細胞系相關產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
H-1793細胞系相關產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
B78細胞系相關產(chǎn)品：RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
CTX TNA2細胞系相關產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
T-24細胞系相關產(chǎn)品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
TCCSUP細胞系相關產(chǎn)品：DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
H-358細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
OC316細胞系相關產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
Colon-26細胞系相關產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
NCI-H1734細胞系相關產(chǎn)品：IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞
ASPC1細胞系相關產(chǎn)品：HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
MDA MB 436細胞系相關產(chǎn)品：U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
UMC-11細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
TE5細胞系相關產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
DHL5細胞系相關產(chǎn)品：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
Hs604T細胞系相關產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
LTEP-sm細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
293S細胞系相關產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
SUM 159PT細胞系相關產(chǎn)品：GM02132細胞、OCILY10細胞、NCIH1563細胞
MDA-175細胞系相關產(chǎn)品：Tn-5細胞、H920細胞、Hs-281-T細胞
RCC-JF細胞系相關產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、H1618細胞、TOV112細胞
SW756細胞系相關產(chǎn)品：MDA-1386細胞、OVCA 420細胞、HUT-125細胞
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