"G-401細(xì)胞：人腎癌Wilms細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：６傳代，每周２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對細(xì)胞代數(shù)，對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
CLONE M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、A3細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
CCD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98G細(xì)胞、IM9細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
C22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞
HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞
A 375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞
CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞
Dami細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
Cor L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞
ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞
H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞
MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞
NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞
HS940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_02_03細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞、A-9細(xì)胞
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid細(xì)胞： No. 18細(xì)胞
H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞
Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞
A-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞
OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞
DITNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES-1細(xì)胞、LU165細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞
HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞
NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma細(xì)胞：細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞
H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4-I細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、T8細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
Mel526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-MS細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
NCIH1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
V79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞
KATO 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞
Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞
16HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞
Chinese Hamster Ovary細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞
HCC1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞、H-3255細(xì)胞
H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-CA 432細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞、YAC細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞
OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞
GLRK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS-2細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞、67NR細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
WM 239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞
HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞
OCI-Ly 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞
CCD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98G細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞
SuperTube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、H1954細(xì)胞
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