"BV-2細(xì)胞：小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：源于C５７BL/６小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞，表達(dá)核v-myc、染色體v-raf癌基因，表面表達(dá)envgp７０抗原，在形態(tài)學(xué)、表型及功能上有吞噬細(xì)胞的特征。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：６傳代；２-３天１次。
細(xì)胞來(lái)源說明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：半貼壁生長(zhǎng)
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我常看到一個(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
LLCPK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞
SH-SY5Y Parental細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-70細(xì)胞、YD38細(xì)胞、Calu6細(xì)胞
NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
BS-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞、H-1693細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 8994細(xì)胞、H-929細(xì)胞、293H細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
HEL-92-1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-70細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞
SUP-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞
UMUC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCAEC細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞
NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞
Ketr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞
NCI-H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細(xì)胞、H209細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞
Becker細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI38細(xì)胞、L細(xì)胞：細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞
SUP-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞
MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞
H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 125細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞
GM00637I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞
BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞
Huh7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
NCIH1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 B細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞
BJAB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞
BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞
CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞
5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞
HEL-92-1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-70細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞
NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞
Epstein-Barr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG44細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞
BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞
Cates-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK 21細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞
190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞
Mahlavu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細(xì)胞、MB468細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞
NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞
MRMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞、CORL88細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
TCMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞、H-23細(xì)胞
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞
T 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
253J-Bladder-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
FU-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞
LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
BS-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞、H-1693細(xì)胞
GM3570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-729細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞、GM02132細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
KMST-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF-1細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細(xì)胞、LS123細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
130 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 325細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
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