"SK-MES-1細胞：人肺鱗癌細胞系
細胞背景資料：源于一位６５歲患有肺鱗狀細胞癌的白人男性，自轉移性胸腔積液分離而來。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
【懸浮型細胞的傳代操作】１)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心１０００rpm ５分鐘；２)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)?！咀⒁馐马棥浚?嚴格的無菌操作；２)適度消化：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。附：EDTA(０.０２％四乙酸二鈉)消化液配方：EDTA ０.２０g，NaCl ８.００g，KCl ０.２０g，KH２PO４ ０.０２g，葡萄糖 ２.００g，０.５％紅４ml，加入蒸餾水定容至１０００ml。１０磅２０min高壓滅菌，使用時調節(jié)PH值到７.４。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要徹底清洗，否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁。
MOLM-13細胞系相關產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
EFM19細胞系相關產(chǎn)品：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
HCa/16A3-F細胞系相關產(chǎn)品：SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
PTK2細胞系相關產(chǎn)品：JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞
Hs606T細胞系相關產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
16HBE細胞系相關產(chǎn)品：MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
VK2/E6E7細胞系相關產(chǎn)品：ESC細胞、H660細胞、C17細胞
ZR7530細胞系相關產(chǎn)品：Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞
NCI-H716細胞系相關產(chǎn)品：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
SO-RB50細胞系相關產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
CWR22Rv1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
HuLEC-5a細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
WTRL1細胞系相關產(chǎn)品：AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
HCC-1500細胞系相關產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
Ra No. 1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
P-815細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
P-815細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
OCIAML5細胞系相關產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
CEM-CCRF細胞系相關產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
SU-DHL-4細胞系相關產(chǎn)品：NCI-522細胞、SW 579細胞、NIHOVCAR3細胞
Be-Wo細胞系相關產(chǎn)品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
HDQ-P1細胞系相關產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞、HCC-2108細胞
ARIP細胞系相關產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品：H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
Fu97細胞系相關產(chǎn)品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
Malme3M細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
Hs675T細胞系相關產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
LS-411細胞系相關產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
FD-LSC-1細胞系相關產(chǎn)品：DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
MESSA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
OE-33細胞系相關產(chǎn)品：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
Lewis-Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
Anip[973]細胞系相關產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
T98G細胞系相關產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
PT67細胞系相關產(chǎn)品：CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
CAKI.1細胞系相關產(chǎn)品：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
SW 1783細胞系相關產(chǎn)品：BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
NCI-H1105細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
TCC Sup細胞系相關產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
EC-109細胞系相關產(chǎn)品：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
RGC6細胞系相關產(chǎn)品：SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
NCI.H23細胞系相關產(chǎn)品：KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
SUDHL-16細胞系相關產(chǎn)品：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞
2E8細胞系相關產(chǎn)品：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
MPP-89細胞系相關產(chǎn)品：Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
H-209細胞系相關產(chǎn)品：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
JHH2細胞系相關產(chǎn)品：DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
FRTL-5細胞系相關產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
MFE 296細胞系相關產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
PC-12細胞系相關產(chǎn)品：SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
NCIH1792細胞系相關產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
SNU638細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
BRL 3A細胞系相關產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關產(chǎn)品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
H2066細胞系相關產(chǎn)品：H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
hA549細胞系相關產(chǎn)品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
STTG1細胞系相關產(chǎn)品：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞
UMUC3細胞系相關產(chǎn)品：JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
OPM2細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
HT-1197細胞系相關產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
U87 MG細胞系相關產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
SF539細胞系相關產(chǎn)品：K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞
H69/P細胞系相關產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞
KYSE140細胞系相關產(chǎn)品：H1573細胞、DF1細胞、LNCaP clone FGC細胞
RPMI 2650細胞系相關產(chǎn)品：JIMT細胞、Ball 1細胞、A 2058細胞
HCA 7細胞系相關產(chǎn)品：H-292細胞、WI38細胞、751-NA細胞
NCIH1581細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C2A細胞、CMT-93細胞、MHCC97-L細胞
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