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產(chǎn)品描述：

產(chǎn)品名稱(chēng)：MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

描述:

MTT 法又稱(chēng) MTT 比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線(xiàn)粒體中的琥珀 酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT 結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比，吸光度越大，表示細(xì)胞活性越強(qiáng)，說(shuō)明藥物毒性越小。該方法已廣泛用于一些生物活性因子 的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度 高、經(jīng)濟(jì)。

別名: MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒；MTT kit

使用方法: 1、將細(xì)胞板放置于無(wú)菌操作臺(tái)中。 2、在細(xì)胞板中每孔加入10%體積的 MTT溶溶劑。 【MTT溶液的配制：用5ml MTT溶劑溶解25mg MTT，配制成5mg/ml的MTT溶液。配制后即可使用，或直接-20℃避光保存，也可以根據(jù)需要適當(dāng)分裝后-20℃避光保存?！?3、將細(xì)胞板放回培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育3 - 4小時(shí)。做對(duì)比試驗(yàn)時(shí)，孵育時(shí)間需一致。 4、孵育后將細(xì)胞板從培養(yǎng)箱中拿出，按照下面的方法溶解產(chǎn)生MTT甲臜結(jié)晶物。 （1）如果是貼壁細(xì)胞，則棄去培養(yǎng)基。加入與初始體積等量的Formazan Solvent。每孔的溶解液體積可能不同，但為了方便比較，總體積須保持一致。 （2）如是非貼壁細(xì)胞或培養(yǎng)基的去除會(huì)造成MTT甲臜丟失，則直接在培養(yǎng)基中加入與初始體積等量的溶解 液。 （3）加入 Formazan Solvent 后，須在 1 小時(shí)內(nèi)完成讀數(shù)。 5、在搖床中溫和地振蕩可增強(qiáng)溶解。某些情況下，尤其是細(xì)胞密度較高時(shí)，需要反復(fù)吹打使 MTT 甲臜結(jié) 晶物完全溶解。 6、分光光度計(jì)測(cè)定 OD570 和參考波長(zhǎng) OD690。 7、96 孔板可以在配備合適濾光片的酶標(biāo)儀上進(jìn)行檢測(cè)。 8、其他類(lèi)型的多孔板則需用合適大小的比色皿或讀板器進(jìn)行分光光度檢測(cè)。

儲(chǔ)存/保存方法: 2~8℃，避光保存，有效期12個(gè)月。

注意事項(xiàng): 1、由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一方面，由于96孔板周?chē)蝗ψ钊菀渍舭l(fā)，可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。 2、若所用受試化合物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2~3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。 3、Formazan的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成正比，也受作用時(shí)間的影響，因此樣品較多時(shí)測(cè)定的結(jié)果可能隨時(shí)間而變。 4、本品含有致癌物質(zhì)，避免與皮膚和眼睛接觸，請(qǐng)小心操作。為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 5、本產(chǎn)品只用于科研，不可應(yīng)用于臨床或診斷。

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