"JOSK-M Thawing人急性單核細胞白血病細胞系
細胞背景資料：急性單核細胞白血??；男性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
JOSK-M Thawing人急性單核細胞白血病細胞系
細胞生長：懸浮
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
JOSK-M Thawing人急性單核細胞白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SKBR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞
Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞
OE21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
MDA-MB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
SNU5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞
HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
MyLa 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、X63細胞、RPMI 8226/S細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、NG10815細胞
MC-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
LA4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞
SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
JOSK-M Thawing人急性單核細胞白血病細胞系
TE13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
Hs 606細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
OAW42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
PANC0203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
HCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
2B4-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
SKCol1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
HCT-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞
NCIH1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
COLO 741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞
HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
HL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
NCI-H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
JOSK-M Thawing人急性單核細胞白血病細胞系
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
32D CL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞
A2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞
JHH-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
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