"KHYG-1 Thawing人NK細胞淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：NK細胞淋巴瘤/白血??；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
KHYG-1 Thawing人NK細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長：懸浮
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KHYG-1 Thawing人NK細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
GM03569D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
2B4-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
CaES-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
P30-OHKUBO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細胞、PC-3/M細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細胞、A-2058細胞、NALM-6-M1細胞
DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
SUSM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞
KHYG-1 Thawing人NK細胞淋巴瘤細胞系
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
H184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
NCI H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
ECC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
Ra #1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
COLO 680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
KP 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
MPC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
KHYG-1 Thawing人NK細胞淋巴瘤細胞系
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
ABC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
A9(Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
Fao細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
EFO-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
"