HONE-1 Thawing人鼻咽癌細胞系

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發(fā)貨地	上海
更新日期	2025-07-07

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產品詳情

中文名稱:HONE-1 Thawing人鼻咽癌細胞系	英文名稱:HONE-1 Thawing
保存條件: 低溫避光	純度規(guī)格: 1x10(6)viable cells/ml
產品類別: 有機化學品

"HONE-1 Thawing人鼻咽癌細胞系

細胞背景資料：鼻咽癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HONE-1 Thawing人鼻咽癌細胞系

細胞生長：貼壁

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)，凍存密度可根據細胞特性進行調整；凍存細胞保存溫度應低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用；程序降溫盒復溫至室溫備用。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系

HONE-1 Thawing人鼻咽癌細胞系

細胞生長特性：貼壁

細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

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關鍵字： HONE-1 Thawing人鼻咽癌細胞系

公司簡介

上海賓穗生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產、銷售與服務于一體的專業(yè)生物制品和化學品供應商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū)，擁有現代化辦公大樓、標準實驗室與生產廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術團隊，提供超過100000的生物、化學產品，產品涵蓋化學、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領域。公司秉承“客戶至上、服務一流”的發(fā)展理念，致力于將優(yōu)質的產品和服務提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源，以匠心服務廣大客戶，我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內外各種品牌的高品質試劑產品，充分滿足客戶的試劑需求。

成立日期	2018-01-10 （8年）	注冊資本	635萬元人民幣
員工人數	50-100人	年營業(yè)額	￥ 500萬-1000萬
主營行業(yè)	通用試劑,高純試劑,催化試劑,基礎無機試劑	經營模式	工廠,服務

上海賓穗生物科技有限公司

VIP 6年

公司成立：8年
注冊資本：635萬元人民幣
企業(yè)類型：有限責任公司(自然人投資或控股)
主營產品：生物試劑、化學試劑、標準品、化工試劑
公司地址：手機號/微信號：18301908279 【上海市紫竹科學園區(qū)】

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