"HET-1A Thawing人食管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：食管；上皮細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HET-1A Thawing人食管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HET-1A Thawing人食管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞
P30 OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細(xì)胞、M-1細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞
WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、TEC細(xì)胞
LS174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEC細(xì)胞、33604細(xì)胞、H1838細(xì)胞
HCC-1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10A細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
BpRc1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME1細(xì)胞、H1048細(xì)胞、IM-9細(xì)胞
RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
SNU638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
MADB 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞
SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
BC-PAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞
HET-1A Thawing人食管上皮細(xì)胞系
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞
WM239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320D細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞、TU 686細(xì)胞
SW 626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞
MDA-MB-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、HS-729細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
BC-PAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞
LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞
H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細(xì)胞、OC 316細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞
H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1143細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
RIN Cl-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞、GM15452細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
HET-1A Thawing人食管上皮細(xì)胞系
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞
PGLH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-11細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞
GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞
CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
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