"RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：前列腺癌；C５７BL/６
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
AC29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細(xì)胞、H8細(xì)胞、GM3190細(xì)胞
PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞
LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞
GC9811-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip973細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
NB1-RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10.G4.1細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
SUM102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPAE細(xì)胞、GS9L細(xì)胞、H2.35細(xì)胞
OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、H2085細(xì)胞
B16F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
SNU-368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML12細(xì)胞、MS 751細(xì)胞、5-8F細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞
HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2_03細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細(xì)胞系
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
Hi-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1438細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
DI-TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12CPM6細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞
PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞
NCI-H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-6細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞
HOS-143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL6A/C1細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-Olig2細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞
T47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞
SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞
HCC-1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞
KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細(xì)胞、COV362細(xì)胞、SNU216細(xì)胞
KP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細(xì)胞、PAa細(xì)胞、NRCC細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
Huh7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞
ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細(xì)胞系
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
SF763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞、PBMC細(xì)胞
JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細(xì)胞、SUM159細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞
LPC-H12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 42細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞
BEND細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-Rh 30細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞
T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞
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