"HCT 116 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：結(jié)腸腺癌；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HCT 116 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCT 116 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞
Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞
Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞
P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞
NFHIOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM356細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞
H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞
OLN 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co320細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞
1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞
Hep G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU1細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞
Hs27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞
CA46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞
HCC1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞、DMS53細(xì)胞
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞
Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
38C13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
HCC1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO 81-1細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞
HCT 116 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
HEK293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
Panc_02_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-19細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞、KU1919細(xì)胞
PK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-BE1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
C81-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB 6細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞
A9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1688細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、A-10細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC PRF 5細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞、GM02219細(xì)胞
SuDHL 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、CATHa細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
SUDHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞
102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞
TCCSUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞
KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細(xì)胞、COV362細(xì)胞、SNU216細(xì)胞
HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞
HCT 116 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞
SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞、SUM159細(xì)胞
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