"RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類(lèi)型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿(mǎn)滿(mǎn)的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
SK-MEL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞
CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞
Jurkat 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
SK-MEL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞
NCIH1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1573細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞
PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、KMS11細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
HeLa S 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
HEL-92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞
Hs746-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 4475細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞、KY-270細(xì)胞
BHP 10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
DMS-53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
ZR-75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞
ACT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、H1688細(xì)胞
HuT78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
H-920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞
GM-346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞、NBLS細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
FHCRC subclone 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
SGC7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞
HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞
SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞
CATH-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞
SCLC21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞
GP5d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
JKT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
HCC-2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
SW 1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細(xì)胞、NB19細(xì)胞、R2C細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞
SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞
"