"MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：骨肉瘤；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測，而且它對(duì)細(xì)胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
QGY7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞
HFE-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞
OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞
NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞
RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
L-1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MJ細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞
RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞
PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
DH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細(xì)胞、T98細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞
CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞
FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細(xì)胞系
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞
F-36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa 1-6細(xì)胞、NB9細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞
MDAPCa2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞
NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
NCI-H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP FGC細(xì)胞、V79細(xì)胞、H2087細(xì)胞
NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞
Vero C1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞、TW01細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
Panc02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞
SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞
NCI-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
CHP 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞
SK-N-BE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8/MOSEC細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞
NG 108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞、A431細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
HO-1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGLH7細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細(xì)胞系
SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
NCIH1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞
HEK293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞
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