"KGN Thawing人卵巢顆粒細胞系
細胞背景資料：該細胞株是顆粒細胞瘤。細胞在加入人體絨膜促性腺激素后可能產(chǎn)生孕酮。細胞生長緩慢。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KGN Thawing人卵巢顆粒細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KGN Thawing人卵巢顆粒細胞系
細胞生長特性：貼壁
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
WC00059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
CORL26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、NCI H226細胞、IGR.OV1細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-2細胞、H-2135細胞、GM 2132細胞
hTERT-RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
LED-WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
HEK;293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
CW2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞
KGN Thawing人卵巢顆粒細胞系
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞
Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
LTPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞
S3 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
CL MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
HCT.116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
16HBE14o-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
HTori-3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
KGN Thawing人卵巢顆粒細胞系
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
ACC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
"