"KYSE-30 Thawing人食道癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：來源于一位６４歲，患有高分化的中段食管鱗癌的男性患者。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
KYSE-30 Thawing人食道癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候，有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項(xiàng)：１.打開無菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈，消毒半小時(shí)以上。２.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái)，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KYSE-30 Thawing人食道癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
SF767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞
CAL148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895T細(xì)胞、QG-56細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞
NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞
HcaF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、RT-112細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1755細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞
HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞
KYSE-30 Thawing人食道癌細(xì)胞系
H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細(xì)胞、CPAE細(xì)胞、A-427細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞
SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
A10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞
HCC2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞
HEL-92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞
Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
U-266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞
H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
C 643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細(xì)胞、HTh74細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞
CCFSTTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL105細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
HEK293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87-MG細(xì)胞、251MG細(xì)胞、B16F10細(xì)胞
SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
H4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞
SUDHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞、LS123細(xì)胞
KYSE-30 Thawing人食道癌細(xì)胞系
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
RD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞
COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞
SP-2/0-AG14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細(xì)胞、MN60細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
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