"U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料：U-２５１ MG分離至一位患者的膠質(zhì)母細胞瘤組織。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
MFM223細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
C-127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
RPE-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
U118細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2BBe細胞、NCIH2141細胞、Sol8細胞
2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細胞、SGC-7901/DDP細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
KCL22S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
C3H/10T1/2 CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT4細胞、NUGC3細胞、MCF.10A細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
D341MD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞
hTERT-HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
KBM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
H-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
MCF10-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
BAC1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
J-774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
NCIH526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
HCC0827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
MDCK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
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