"KMB-17 Thawing人二倍體細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KMB-17 Thawing人二倍體細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KMB-17 Thawing人二倍體細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
NCI-SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
Line 207細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
DI TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞
H2052_MM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
HCC-202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、H-774細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細胞、NCI-H2135細胞、HS688AT細胞
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
SupB15WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
OC-316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞
KMB-17 Thawing人二倍體細胞系
DU-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、Hx-147細胞
HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
SKMEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
NU-GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
Vero-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
L 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
VMM5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
U-937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
C57/B6-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs611T細胞、CCD-112CoN細胞、P3 88 D1細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
WC00097細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
SNK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
TE-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
KMB-17 Thawing人二倍體細胞系
BEL/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
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