"Panc02 Thawing小鼠胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
Panc02 Thawing小鼠胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Panc02 Thawing小鼠胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
Pt K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞、KM12細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞
HTR-8/SV-neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞
EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞
COLO 680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細(xì)胞、J45.01細(xì)胞、5637細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
HEL-92-1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-70細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H460細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、KU 812細(xì)胞
KHYG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
PL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
LP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞、AML12細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
SF 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞、SUM102細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
Panc02 Thawing小鼠胰腺癌細(xì)胞系
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-69細(xì)胞、WI38細(xì)胞、H-292細(xì)胞
MIA PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
NCI-H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH-a細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞、H-196細(xì)胞
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
OV1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞
LICR-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞
PANC-08-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
LOU-NH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
AdHek細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT101細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞
SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞
H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
SHIN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910PM細(xì)胞、H187細(xì)胞、PC 61細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
HSAS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞
C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞
TE 85 ClF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞
3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞
Panc02 Thawing小鼠胰腺癌細(xì)胞系
MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC PRF 5細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞、GM02219細(xì)胞
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞
COS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4C細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、CL-34細(xì)胞
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞
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