"ECC12 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
ECC12 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ECC12 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
ACC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
MESSADX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細胞、LIPF178C細胞、C918細胞
HS 683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H522細胞、MCF-12F細胞、SKRC-52細胞
C-4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
SKGIIIA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
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LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
H-196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞
NCTC clone 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
NW38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
CNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞
SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
Hs 281.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
K562/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
NCI-H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
STO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
LS513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
ECC12 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
769P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細胞、AU-565細胞、H-1770細胞
HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
RGC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
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