"SNU-449 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SNU-449 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：５-１：１０傳代；每周２-３次
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SNU-449 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；多角形
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
H-2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞
RBL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞
LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞
C3H-10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、SNU368細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、DCS細(xì)胞
CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
IMR-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞
MDA-MB-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H23細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞、H-1930細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
Hs-940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞
PC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞
CZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞、HMC細(xì)胞
SNU-449 Thawing人肝癌細(xì)胞系
B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
NCI-H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細(xì)胞、H22細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞
SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞、SUM159細(xì)胞
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
SK Mel28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞
Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞
MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞
CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞
NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞
TGW-nu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞
JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
Psi-2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC-E2G8細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞
HNEpC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞、C4-I細(xì)胞
MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞
SUM 149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細(xì)胞、SHEE細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞
SNU-449 Thawing人肝癌細(xì)胞系
2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細(xì)胞、1301細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞
H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細(xì)胞、PTK2細(xì)胞、EB2細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞
PC-9S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
MDA.MB.231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
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