"DMS 273 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
DMS 273 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DMS 273 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
SK-RC 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細胞、RPMI 6666細胞、Caco2BBe細胞
H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、PC-3M-IE8細胞、NCI-522細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
DMS 273 Thawing人小細胞肺癌細胞系
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
C17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
NW-MEL-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
SKO3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
Jurkat-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
HT55細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
Mino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
LY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
DMS 273 Thawing人小細胞肺癌細胞系
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
NCI-H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
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