"SW954 Thawing人陰戶(hù)鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
SW954 Thawing人陰戶(hù)鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀(guān)察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代,2-3天換液1次。
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀(guān)察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SW954 Thawing人陰戶(hù)鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿(mǎn)滿(mǎn)的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀(guān)察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
WM-266-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2066細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞
MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、C666-1細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞
MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
SW954 Thawing人陰戶(hù)鱗癌細(xì)胞系
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
QGY-7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
RMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞
RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞
Dami細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞
SW954 Thawing人陰戶(hù)鱗癌細(xì)胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
AM-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞、HN-6細(xì)胞
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
ES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞
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