"HuP-T4 Thawing人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HuP-T4 Thawing人胰腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HuP-T4 Thawing人胰腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
ES2細胞系相關產(chǎn)品：OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
ROS 17/28細胞系相關產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
MPVECs細胞系相關產(chǎn)品：WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
ROS-17/2.8細胞系相關產(chǎn)品：MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
SNU-1040細胞系相關產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
CHP 126細胞系相關產(chǎn)品：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
H23細胞系相關產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
M2-10B4細胞系相關產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
SHEE細胞系相關產(chǎn)品：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
CEF細胞系相關產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞
AK細胞系相關產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞
MC-38細胞系相關產(chǎn)品：OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
SK-N-F1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
HR-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293F細胞、hRPTC細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞
WERIRb1細胞系相關產(chǎn)品：Clone 15 HL-60細胞、Hs27F細胞、HPAF-I細胞
SF-295細胞系相關產(chǎn)品：HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
no-11細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
SW954細胞系相關產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
W256細胞系相關產(chǎn)品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞
HaCaT細胞系相關產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
NCI-H2444細胞系相關產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
NS1-Ag4細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞
Detroit562細胞系相關產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
HuP-T4 Thawing人胰腺癌細胞系
WEHI 3B細胞系相關產(chǎn)品：Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
LL2細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
HCEC-12細胞系相關產(chǎn)品：GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
NCIH295R細胞系相關產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
A-375SM細胞系相關產(chǎn)品：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞
alpha TC1-6細胞系相關產(chǎn)品：Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
RK 13細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
WM-239細胞系相關產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
3 LL細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
MDA-134細胞系相關產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
CCD19-Lu細胞系相關產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞
GM03570細胞系相關產(chǎn)品：Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
KM12SM細胞系相關產(chǎn)品：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
KP2細胞系相關產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
MESSA Dx5細胞系相關產(chǎn)品：PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞
HN6細胞系相關產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
Jurkat E6-1細胞系相關產(chǎn)品：CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
QSG-7701細胞系相關產(chǎn)品：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
MDAMB175VII細胞系相關產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
TR-146細胞系相關產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
Hs675細胞系相關產(chǎn)品：H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
PY8119細胞系相關產(chǎn)品：Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關產(chǎn)品：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
Tissue Culture-1細胞系相關產(chǎn)品：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
CL1.0細胞系相關產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
WiDr細胞系相關產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
CWR-22rv1細胞系相關產(chǎn)品：H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
HuP-T4 Thawing人胰腺癌細胞系
PANC 813細胞系相關產(chǎn)品：HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
BOWES細胞系相關產(chǎn)品：T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞
OVCA 433細胞系相關產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
B78細胞系相關產(chǎn)品：RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
GLAG-66細胞系相關產(chǎn)品：Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
T.T細胞系相關產(chǎn)品：SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
H-1437細胞系相關產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
A7r5細胞系相關產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
CCLP1細胞系相關產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
H9c2細胞系相關產(chǎn)品：DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞
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