"OVISE Thawing人卵巢癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
OVISE Thawing人卵巢癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：５ x １０^４ cells/ml
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OVISE Thawing人卵巢癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
NBL-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
BV2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
Oregon J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
293GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
Melanoma 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細胞、NS1細胞、Me Wo細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、HTori:3細胞、HL7702細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
COLO 320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
OVISE Thawing人卵巢癌細胞系
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
NCIH2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
RIN-m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
OVISE Thawing人卵巢癌細胞系
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
M3 Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
hUC-MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞
B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞
KM-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
LU65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
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