"NCI-H69 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H69 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H69 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長，聚團
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：聚團懸浮
Kit225-K6細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
RPTC細胞系相關產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
38C-13細胞系相關產(chǎn)品：MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞
SKGIIIA細胞系相關產(chǎn)品：Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
RCK-8細胞系相關產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
SKMES1細胞系相關產(chǎn)品：MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
NCM460細胞系相關產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
HNE3細胞系相關產(chǎn)品：GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關產(chǎn)品：H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
KALS-1細胞系相關產(chǎn)品：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
MDCKII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
HRA-19細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H441細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、LWnt-3A細胞
HEC-1A細胞系相關產(chǎn)品：Oka-C1細胞、H-740細胞、253JB-V細胞
SUDHL10細胞系相關產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
MV-3細胞系相關產(chǎn)品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
Mono Mac6細胞系相關產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
HCC 38細胞系相關產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
OV-2008細胞系相關產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
OV-2008細胞系相關產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
BJAB細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
H2286細胞系相關產(chǎn)品：KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
CAL 12T細胞系相關產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
HCC15細胞系相關產(chǎn)品：FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
NCI-H69 Thawing人小細胞肺癌細胞系
Ku812細胞系相關產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
MC3T3-E細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
Bac 1.2F5細胞系相關產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
WC00097細胞系相關產(chǎn)品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
HuH-28細胞系相關產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
CL1細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
Psi2 DAP細胞系相關產(chǎn)品：NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
B16/F1細胞系相關產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
SK HEP 01細胞系相關產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
Tca-83細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
OVCA-433細胞系相關產(chǎn)品：HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
RT112細胞系相關產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
NCIH250細胞系相關產(chǎn)品：NCIH322細胞、8305-C細胞、SNU-761細胞
CORL88細胞系相關產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
COLO824細胞系相關產(chǎn)品：U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
RASMC細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
3T3-F442A細胞系相關產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
U-138MG細胞系相關產(chǎn)品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
NuTu 19細胞系相關產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
LAN1細胞系相關產(chǎn)品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
TFK-1細胞系相關產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
T_T_細胞系相關產(chǎn)品：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
MKN-1細胞系相關產(chǎn)品：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
MDA-435細胞系相關產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
HCT.116細胞系相關產(chǎn)品：SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞
SW982細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞
HET1A細胞系相關產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
CCD-112CoN細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
NCI-H69 Thawing人小細胞肺癌細胞系
H-1694細胞系相關產(chǎn)品：HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
OVCAR433細胞系相關產(chǎn)品：BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
L1210細胞系相關產(chǎn)品：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞
HcaF細胞系相關產(chǎn)品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
MCF10A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
NCI-446細胞系相關產(chǎn)品：RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞
KRC/Y細胞系相關產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
H4-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
HepG2細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞
DK-MG細胞系相關產(chǎn)品：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
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