"DMS 114 Thawing人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
DMS 114 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DMS 114 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
UMNSAH/DF-1細胞系相關產(chǎn)品：NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞
BALL1細胞系相關產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
HCC0095細胞系相關產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
Molm 14細胞系相關產(chǎn)品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
SCL-II細胞系相關產(chǎn)品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
Calu3細胞系相關產(chǎn)品：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
KYSE-30細胞系相關產(chǎn)品：95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
KYSE-180細胞系相關產(chǎn)品：SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
OLN 93細胞系相關產(chǎn)品：Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞
MIN6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
J 111細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
MC-3T3細胞系相關產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
WM115mel細胞系相關產(chǎn)品：Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞
CFSC-8B細胞系相關產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
PC-3M細胞系相關產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、Hs706T細胞、PA317細胞
HCT-8/V細胞系相關產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、STTG1細胞、HuTu-80細胞
CCD-33Co細胞系相關產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
Clone Y-1細胞系相關產(chǎn)品：C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
CHO-ori細胞系相關產(chǎn)品：FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
HNE3細胞系相關產(chǎn)品：GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產(chǎn)品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產(chǎn)品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
TE 354.T細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
OCI-Ly07細胞系相關產(chǎn)品：MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞
NCIH2085細胞系相關產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
L5178Y細胞系相關產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
DMS 114 Thawing人肺癌細胞系
H1781細胞系相關產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
751細胞系相關產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
PL5細胞系相關產(chǎn)品：PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
HOP 62細胞系相關產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
MDCKII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
PF382細胞系相關產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
GM07404D細胞系相關產(chǎn)品：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
RINm-5F細胞系相關產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
NCI-H23細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
CFPAC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
CMT167細胞系相關產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
SNU878細胞系相關產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
Karpas 422細胞系相關產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
ECC12細胞系相關產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
C-33A細胞系相關產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
JURKAT E-61細胞系相關產(chǎn)品：MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
BT-B細胞系相關產(chǎn)品：HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞
H-520細胞系相關產(chǎn)品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
NRK-52E細胞系相關產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
Colon26細胞系相關產(chǎn)品：ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
CCLP1細胞系相關產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
TE 354.T細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
P-815細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
Calu6細胞系相關產(chǎn)品：Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
A7r5細胞系相關產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
H-446細胞系相關產(chǎn)品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
769-P細胞系相關產(chǎn)品：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
H1693細胞系相關產(chǎn)品：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
H4-IIE-C3細胞系相關產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
DMS 114 Thawing人肺癌細胞系
OCI-Ly 8細胞系相關產(chǎn)品：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
L-Wnt3A細胞系相關產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
NCCIT細胞系相關產(chǎn)品：L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
Pt K2 (NBL-5)細胞系相關產(chǎn)品：NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞
Nb 2細胞系相關產(chǎn)品：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
WM 239細胞系相關產(chǎn)品：PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關產(chǎn)品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關產(chǎn)品：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
EC-109細胞系相關產(chǎn)品：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
A-375SM細胞系相關產(chǎn)品：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
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