"NCI-H2405 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H2405 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：５-１：８傳代
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H2405 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：混合生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
SUM 102PT細胞系相關產(chǎn)品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
TN5B14細胞系相關產(chǎn)品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
TE-13細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
NCI-H2228細胞系相關產(chǎn)品：HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
SCL II細胞系相關產(chǎn)品：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞
P-3J細胞系相關產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
Nb2-11細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
LS-513細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
769-P細胞系相關產(chǎn)品：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
SU-DHL-6細胞系相關產(chǎn)品：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
C-Lu65細胞系相關產(chǎn)品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
M 1細胞系相關產(chǎn)品：32D.cl3細胞、MMQ細胞、ML2細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：MonoMac 6細胞、L-WRN細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
BetaTC6細胞系相關產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
MDCKII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
HRA 19細胞系相關產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
NCI-H2110細胞系相關產(chǎn)品：E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
KYSE450細胞系相關產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
KYSE450細胞系相關產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
BrCL15細胞系相關產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
H810細胞系相關產(chǎn)品：C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關產(chǎn)品：RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
NCI-H2405 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
H1385細胞系相關產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
Tca-8113細胞系相關產(chǎn)品：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
H4-II-EC3細胞系相關產(chǎn)品：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
NCI-H774細胞系相關產(chǎn)品：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
D-283 Med細胞系相關產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
FD-LSC-1細胞系相關產(chǎn)品：DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
Nb2a細胞系相關產(chǎn)品：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
A3細胞系相關產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
NCI-460細胞系相關產(chǎn)品：CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
McCoy B細胞系相關產(chǎn)品：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
SK RC 20細胞系相關產(chǎn)品：OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞
U118細胞系相關產(chǎn)品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
SF 126細胞系相關產(chǎn)品：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞
LS1034細胞系相關產(chǎn)品：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
Nb 2細胞系相關產(chǎn)品：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
EST81細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
L-428細胞系相關產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
HEEpiC細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
GM12878細胞系相關產(chǎn)品：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
T-98G細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
LU-65M細胞系相關產(chǎn)品：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
SNU-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
SCLC21H細胞系相關產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
RL-95-2細胞系相關產(chǎn)品：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
P31/FUJ細胞系相關產(chǎn)品：SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞
CHP 100細胞系相關產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
MFM223細胞系相關產(chǎn)品：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
NPC-TW 01細胞系相關產(chǎn)品：SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
H2444細胞系相關產(chǎn)品：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
HCC 38細胞系相關產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
NCI-H2405 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
DMS 114細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
HepG2/C3A細胞系相關產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
HCC-94細胞系相關產(chǎn)品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
H-1651細胞系相關產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
H740細胞系相關產(chǎn)品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
NK-92 MI細胞系相關產(chǎn)品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
HBVP細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
CAKI 1細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
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