"NCI-H1693 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H1693 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代,每周換液２次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H1693 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞
33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞
U-937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細(xì)胞、JM細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞
HMEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
Dunn LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
WM-266-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-50細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
EC109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、COLO678細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
NCI-H1693 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞
SKML-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞
KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞
PA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
Hut292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H650細(xì)胞、GM3569細(xì)胞、H-841細(xì)胞
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞
SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞
Y 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA/Dx5細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
SKLMS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC-21H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞
SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞
NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞
UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞
H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞
S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs578Bst細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
RPTEC/TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞
NCI-H1693 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
HCC-2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
G-402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-MMT-1細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞
MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
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