"NCI-H2444 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H2444 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：４傳代；每周換液２次。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2444 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
SW13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
HMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞
NCI-H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
LI7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細胞、SR-786細胞、SK-ChA1細胞
H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細胞、ROS1728細胞、SW 1783細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
NCI-H2444 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
MV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
D324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
MDCK II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
P-388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
DCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM16136細胞、KMS-26細胞、DU_145細胞
CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
ROS1728細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
PTK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
G402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞
NCI-H2444 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
SHP77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
U-373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
"