"NCI-H774 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H774 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２次。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H774 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
V 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細胞、RERF-LC-MS細胞、P-388細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細胞、BT.549細胞、SKG IIIa細胞
hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
IGR.OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞
Vx2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞
NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
NCI-H774 Thawing人小細胞肺癌細胞系
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
Hs729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
COLO-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
LA4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞
OCI-LY-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
H-1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
Kit225/K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J111細胞、GM00215細胞、OCI-AML4細胞
VCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
SHIN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞
Hs683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
NCI-H774 Thawing人小細胞肺癌細胞系
EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
DC2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
CFSC-8B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
NH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞
Panc-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞
"