"HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細胞系
細胞背景資料:最初認為這個細胞源自喉上皮癌,但隨后通過同功酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn),起源細胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導(dǎo)致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細胞系
常見培養(yǎng)細胞預(yù)防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導(dǎo)抗藥細菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:貼壁生長
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當細胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序:采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當溫度達-25℃以下時,5~10℃/min;當溫度達-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細胞生長液(92%血清)2.取對數(shù)生長期細胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量凍存液,用吸管吹打制成細胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細胞/ml)。3.加入1ml細胞于凍存管中,密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng),24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
NCI-H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
1301細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細胞系
LC1/Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
STO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
JEKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
1E8-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
Kelly細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
HEK293-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
HOS-TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
TE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
DSL-6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞
IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
NOZAWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
Kelly細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細胞系
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細胞、HEK/293細胞、MDA231-LM2細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、H-187細胞、MOVAS細胞
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431/P細胞、HPAF-I細胞、WM 451-Lu細胞
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