"NCI-H441 cell line人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：NCI-H４４１建系于１９８２年（A.F.Gazdar，etal.)。該細(xì)胞分離自一名肺腺癌患者的心包液。該細(xì)胞能在半固體瓊脂糖中形成克隆，并能表達(dá)肺泡表面活性蛋白A。該細(xì)胞在有血清培養(yǎng)基中倍增時(shí)間為５８小時(shí)，在無(wú)血清培養(yǎng)基中倍增時(shí)間為９９-１３８小時(shí)。
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H441 cell line人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無(wú)菌意識(shí)要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面，并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以７０%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無(wú)菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過(guò)線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過(guò)3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
NCI-H441 cell line人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞
CMT-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細(xì)胞、D341MD細(xì)胞、H1105細(xì)胞
RMa-bm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
TOV-112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECGI10細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞、Hs68細(xì)胞
KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞
Huh-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
NCI-H441 cell line人肺腺癌細(xì)胞系
NCI-H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞
H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細(xì)胞、OC-316細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
LC-2-Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細(xì)胞、HLFa細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞
Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
ATN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細(xì)胞、GM-215細(xì)胞、H-727細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-69細(xì)胞、WI38細(xì)胞、H-292細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
KYSE 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞
CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
SUM149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細(xì)胞、PA317細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞
Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
NB9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451細(xì)胞、A-9細(xì)胞、MPC11細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞、TM-4細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2-Luc細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞
231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
U14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、H-1838細(xì)胞
KASUMI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：9L細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞
JiyoyeP-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
BNL CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞
H-2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
NCI-H441 cell line人肺腺癌細(xì)胞系
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、NB9細(xì)胞
RMa-bm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
"