"HCC827 cell line人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:這株細胞建于1994年三月。這株肺腺癌在EGFR酪酸激酶區(qū)域有一個獲得性突變(E746-A750缺失)?;颊咴冢玻禋q到26歲時每個月抽1包煙。在診斷前12年不再抽煙。
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化,對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化,細胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進行,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HCC827 cell line人非小細胞肺癌細胞系
細胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材;②每天觀察細胞形態(tài),掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持:細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現。對每一個細胞系來說都有其自身的特點,要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化5分鐘。1:2。4-5天長滿。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
凍存和復蘇的原則:慢凍快融》當細胞冷到零度以下,可以產生以下變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質濃度升高,并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內不致產生大的冰晶;相反,結晶就大,大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序:采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當溫度達-25℃以下時,5~10℃/min;當溫度達-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內,紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法:1.預先配制凍存液》(1)8%DMSO+細胞生長液(92%血清)2.取對數生長期細胞,經胰酶消化后,加入適量凍存液,用吸管吹打制成細胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細胞/ml)。3.加入1ml細胞于凍存管中,密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法:1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng),24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
HCC827 cell line人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
ARO 81-1細胞系相關產品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
H.Ep.-2細胞系相關產品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
NCI-H2029細胞系相關產品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
MNNGHOS細胞系相關產品:BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
Tissue Culture-1細胞系相關產品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
NCI-H441細胞系相關產品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
SW 839細胞系相關產品:EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
OCI-Ly 8細胞系相關產品:K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
PTK-2細胞系相關產品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
OV-1063細胞系相關產品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
KHYG細胞系相關產品:Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
D407細胞系相關產品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
PLC PRF 5細胞系相關產品:RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
HCC827 cell line人非小細胞肺癌細胞系
RCK-8細胞系相關產品:University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
BrCL18細胞系相關產品:MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
HR1K細胞系相關產品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
HR1K細胞系相關產品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
Hs 766T細胞系相關產品:HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關產品:Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
HK2細胞系相關產品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
IM95細胞系相關產品:CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
UC-3細胞系相關產品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
OVCAR-432細胞系相關產品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
SJSA細胞系相關產品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
HCC-1599細胞系相關產品:B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
ECGI10細胞系相關產品:CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
H87細胞系相關產品:LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
MOLT16細胞系相關產品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
CHP-100細胞系相關產品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關產品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
RM1細胞系相關產品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
MKN7細胞系相關產品:Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
PLA802細胞系相關產品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
EAHY-926細胞系相關產品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
HOC-1細胞系相關產品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
HCC1143細胞系相關產品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
SiHa細胞系相關產品:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
NCTC-1469細胞系相關產品:COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
PFSK-1細胞系相關產品:GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
Jiyoye細胞系相關產品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
H358細胞系相關產品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
KOSC2細胞系相關產品:TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
H-II-E-C3細胞系相關產品:beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
DHL-2細胞系相關產品:Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
FTC-133細胞系相關產品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
SF767細胞系相關產品:A2780CP70細胞、TE14細胞、KE 37細胞
H-747細胞系相關產品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
QGY-7701細胞系相關產品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
R1610細胞系相關產品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
HGC-27細胞系相關產品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
OVCAR-10細胞系相關產品:IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
MKN-7細胞系相關產品:KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
Rat1細胞系相關產品:INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
CA-OV-3細胞系相關產品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
PL45細胞系相關產品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
RGC6細胞系相關產品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
HCC827 cell line人非小細胞肺癌細胞系
HT-55細胞系相關產品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
102PT細胞系相關產品:KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
SNU601細胞系相關產品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
JROECL 33細胞系相關產品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
SCI1細胞系相關產品:HC11 Mammary Epithelium細胞、Chang Cells細胞、MLOY4細胞
R1610細胞系相關產品:H510細胞、SK RC 52細胞、DMS53細胞
NCI-H2029細胞系相關產品:Ku812細胞、MDA231細胞、Caco-2/BBe細胞
"