"MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞背景資料:MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織,該細胞老化前能傳代42~46個倍增時間。
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
U-2932細胞系相關產品:Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
LC-2 ad細胞系相關產品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
R3/1細胞系相關產品:JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
細胞生長:貼壁
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內,水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數,細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法:1:2-1:5傳代;每周1-2次。
MDA-453細胞系相關產品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
SuDHL 4細胞系相關產品:Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
MHCC 97細胞系相關產品:LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
SCC25細胞系相關產品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的完全培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
CHP212細胞系相關產品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞
SNU-719細胞系相關產品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關產品:WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
SK-UT-1細胞系相關產品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞
DMS114細胞系相關產品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
SNU182細胞系相關產品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
HuTu-80細胞系相關產品:Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
PLB-985細胞系相關產品:NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
NCIH1648細胞系相關產品:NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
SEG1細胞系相關產品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
H-510A細胞系相關產品:HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
GM0637細胞系相關產品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
Hs729T細胞系相關產品:NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產品:U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
NTera-2D1細胞系相關產品:HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
BPH-1細胞系相關產品:H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
BPH-1細胞系相關產品:H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
SKGT4細胞系相關產品:BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞
DMS-114細胞系相關產品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
T24細胞系相關產品:KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞
MGH-U1細胞系相關產品:OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關產品:MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
SK-BR3細胞系相關產品:MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
HuLEC-5a細胞系相關產品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
Psi2-DAP細胞系相關產品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
PANC-10-05細胞系相關產品:SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
MDBK細胞系相關產品:ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
HUC-1細胞系相關產品:NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
PANC-03-27細胞系相關產品:hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
RS(4;11)細胞系相關產品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
KG1細胞系相關產品:BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
COLO 699細胞系相關產品:TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞
COLO357細胞系相關產品:NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞
AG 9細胞系相關產品:Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞
H2172細胞系相關產品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產品:U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
RC-K8細胞系相關產品:HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
OVCA-420細胞系相關產品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
MPP89細胞系相關產品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
CAKI1細胞系相關產品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
SGC7901細胞系相關產品:Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
EAhy 926細胞系相關產品:SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
SJSA-1細胞系相關產品:PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關產品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
CWR-22rv1細胞系相關產品:H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
H-740細胞系相關產品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
MOLM-14細胞系相關產品:C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞
COLO-16細胞系相關產品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
COLO-16細胞系相關產品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
HMC細胞系相關產品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
BHP 10-3細胞系相關產品:W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
Madison細胞系相關產品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
Hs 888Lu細胞系相關產品:Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
Calu-6細胞系相關產品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
SKBr3細胞系相關產品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
BC-021細胞系相關產品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
RSC96細胞系相關產品:PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關產品:LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
P 815細胞系相關產品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關產品:HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
MDAMB157細胞系相關產品:MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
BT 20細胞系相關產品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
NCIH508細胞系相關產品:UACC893細胞、NCI-H2228細胞、MOLT3細胞
RSC-364細胞系相關產品:NCI-H-128細胞、CV-1細胞、F442-A細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關產品:WPMY-1細胞、3T3F442A細胞、HeLa S-3細胞
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