"MFE-296 Thawing子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MFE-296 Thawing子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MFE-296 Thawing子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
CCF-STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
SK-MEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
Pt-K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細胞、H719細胞、MFD-1細胞
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU368細胞、HCV-29細胞、OVCAR 433細胞
EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
TE 354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
AMJ2-C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
MFE-296 Thawing子宮內(nèi)膜癌細胞系
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
MGHU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
VK-2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
UM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
MFE-296 Thawing子宮內(nèi)膜癌細胞系
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
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