"HCC2218 Thawing人乳腺導管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCC2218 Thawing人乳腺導管癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２—３次
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC2218 Thawing人乳腺導管癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
P30/OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
Hs695細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
NS-I/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
STC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
A375mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
HAC-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KYSE30細胞、JHH7細胞
A549-Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細胞、HT144mel細胞、Tu177細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
OCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
HCC2218 Thawing人乳腺導管癌細胞系
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
Cor L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
SU-DHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
LI7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
SK-N-FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
H-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
NCI-H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
MIHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
Hs 611.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞
NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
HCC2218 Thawing人乳腺導管癌細胞系
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
AAV-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P19細胞、A1847細胞、HECV細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
PE/CA-PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
H184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
"