"HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每３-４天換液
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
SVHUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
HCPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細胞、NCIH2172細胞、C2-C12細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細胞、H-64細胞、MRC5細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、IEC 18細胞、HLE-SRA-01/04細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
MDA-MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
EJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
LA4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
BEL7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
RC-4B/C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
SW-1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
BT325細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞
AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
RPMI no 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
EnCa1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
NCIH2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
LU451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
NMCG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
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