"H4 Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:H4細(xì)胞系建系于1973年。它衍生于一個患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的37歲病人的腦組織。該細(xì)胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽,細(xì)胞接種動物一般不產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)。該細(xì)胞具有修復(fù)MNNG損傷5型腺病毒的能力。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
H4 Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細(xì)胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液;3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,每周換液2-3次。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細(xì)胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的,電擊對細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H4 Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細(xì)胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細(xì)胞代數(shù),對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
OCI-Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞、GM05862細(xì)胞
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
A-172 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
H4 Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
H-1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
BxPC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細(xì)胞、M 1細(xì)胞、H-345細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
PANC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHAGOK1細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞
C4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
MDCK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
BJAB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF767細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
H4 Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞
HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
SW 626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞
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